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高速離心機分離真菌菌絲體的方法

  • 更新日期:2024-01-30      瀏覽次數:1036
    • 1、分離方法

      1.1 用高速離心機將6種真菌的發酵產物分別置于離心管中,在20℃8000r/min條件下離心10min,分離上清液,收集的菌絲體置于培養皿中。

      1.2 減壓抽濾法6種真菌的發酵產物分別用抽濾裝置進行常溫減壓抽濾將菌絲體與發酵液分開。菌絲體保留在濾紙上,發酵液流入收集瓶中。

      1.3 多層紗布過濾法將折疊8層后的紗布放在培養皿中,分別將6種真菌的發酵產物平攤于紗布,操作者戴無菌乳膠手套,將紗布細心卷起,雙手反向擰緊紗布,使發酵液與菌絲體分離,待無液體流下時,輕輕展開紗布,收集菌絲體。

      2、測定方法

      2.1 分生孢子計數用血球計數器將真菌的孢子懸浮液在顯微鏡下計數。

      2.2 菌絲體含水率菌株培養一定時間后,分別取不同菌種的發酵產物100ml,采用高速離心、真空抽濾和紗布過濾3種方法收集菌絲體,精確稱量菌體濕重(g),然后將菌體在105℃下烘干至恒重,精確稱量干重。

      2.3 高速離心法分離的菌絲體與發酵液采用高速離心法將真菌的發酵產物離心后,6種真菌均表現為菌絲體與發酵液分離,形成絮狀或松散沉淀。用移液器將上清液分離后,將菌絲體置于培養皿中發現,由于菌絲體很輕(只有球毛殼菌的菌絲球堅硬),并且發酵液粘稠,導致離心后收集的菌絲體中仍含有少量發酵液。